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更新時(shí)間:2025-07-05
抗病毒活性試驗(yàn)是將病毒分別接種在試樣和對(duì)照樣上,在特定的接觸時(shí)間后,計(jì)數(shù)剩余的感染性病毒數(shù)量(病毒感染滴度),以抗病毒試樣和對(duì)照樣試樣中剩余感染性病毒的平均對(duì)數(shù)值的差值作為病毒減少值,或以抗病毒試樣和對(duì)照樣試樣中剩余感染性病毒數(shù)量的平均值來計(jì)算病毒減少率。病毒感染滴度采用噬斑法或TCID50法測(cè)定。
抗病毒活性試驗(yàn)-國(guó)家檢驗(yàn)檢測(cè)中心
抗病毒活性試驗(yàn)步驟
1、試樣準(zhǔn)備
所有試樣均置于帶蓋樣品瓶中備用。
如果將培養(yǎng)皿試驗(yàn)條件下放入培養(yǎng)箱時(shí),能保持濕度穩(wěn)定(通過在每個(gè)培養(yǎng)皿上蓋上蓋子),則可在無菌培養(yǎng)皿中制備試樣。在進(jìn)行試驗(yàn)之前,無菌地將試樣轉(zhuǎn)移至無菌瓶中。
2、試樣接種病毒
對(duì)于吸水性試樣,用微量移液器精準(zhǔn)吸取0.2mL病毒懸液多點(diǎn)接種至樣品瓶中的試樣上,然后用瓶蓋密封樣品瓶。
對(duì)于疏水性織物試樣,用微量移液器精準(zhǔn)吸取 0.2mL病毒懸液多點(diǎn)接種至50mmX50 mm的試樣上,再用另一塊50mmX50mm的樣片覆蓋,使試樣抗病毒處理面與病毒懸液充分接觸。對(duì)于疏水性纖維或紗線試樣,用微量移液器精準(zhǔn)吸取0.2mL病毒懸液多點(diǎn)接種至50mmX50mm的試樣上,再用50mmX50mm的不影響病毒活性的塑料薄膜覆蓋,使試樣與病毒懸液充分接觸。
3、接觸時(shí)間
將樣品瓶放入培養(yǎng)箱,在25℃條件下培養(yǎng)2h。經(jīng)相關(guān)方協(xié)商確定后可調(diào)整接觸時(shí)間,但不超過24h,并在試驗(yàn)報(bào)告中注明。
4、接種后立即洗脫病毒
3個(gè)對(duì)照樣試樣接種病毒后,立即在樣品瓶中加入20mL的SCDLP液體培養(yǎng)基,然后將樣品瓶蓋上瓶蓋,用旋渦混合器振蕩5次,每次5s,將病毒從試樣中洗脫下來。
注:該病毒懸液將作為對(duì)照試樣的初始洗脫病毒懸液。
5、接觸時(shí)間后洗脫病毒
3個(gè)對(duì)照樣試樣和3個(gè)抗病毒試樣接觸2h后,在樣品瓶中加入20ml的SCDIP液體培養(yǎng)基,然后蓋上瓶蓋,用旋渦混合器振蕩5次,每次5s,將病毒從試樣中洗脫下來。
注:這些病毒懸液是與對(duì)照樣試樣和抗病毒試樣經(jīng)接觸時(shí)間后的初始洗脫病毒懸液。
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